熒光顯微鏡中的熒光鏡檢術(shù)以及使用熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng):
熒光鏡檢術(shù)是用短波長(zhǎng)的光線照耀用熒光素染色過的被檢物體,使之受激起后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光,然后調(diào)查。熒光鏡檢術(shù)廣泛使用于生物,醫(yī)學(xué)等范疇。
1.熒光鏡檢術(shù)一般分為透射和落射式兩種類型。
(1)透射式:激起光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視界聚光鏡,使激起光不進(jìn)入物鏡,而使熒光進(jìn)入物鏡。它在低倍情況下亮堂,而高倍則暗,在油浸物鏡下較難操作,尤以低倍的照明規(guī)模難于確認(rèn),但能得到很暗的視界背景。透射式不適用于非透明的被檢物體。
(2)落射式:透射式目前簡(jiǎn)直被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式,光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對(duì)透明和不透明的被檢物體都適用。因?yàn)槲镧R起了聚光鏡的效果,不只便于操作,并且從低倍到高倍,可以實(shí)現(xiàn)整個(gè)視場(chǎng)的均勻照明。
2.熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng)
(1) 激起光長(zhǎng)期的照耀,會(huì)產(chǎn)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)像,因此盡可能縮短調(diào)查時(shí)間,暫時(shí)不調(diào)查時(shí),使用擋板隱瞞激起光。
(2)作油鏡調(diào)查時(shí),使用“無熒光油”。
(3)熒光簡(jiǎn)直都較弱,應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。
(4)電源*裝穩(wěn)壓器,不然電壓不穩(wěn)不只會(huì)降低汞燈的壽命,也會(huì)影響鏡檢的效果。
目前許多新式生物研討范疇使用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(FISH)等等。