在光學顯微鏡下精確測量微生物的大小，主要依賴于目鏡測微尺這一工具，并遵循一系列嚴謹的操作步驟。以下是詳細的測量過程：

一、工具準備與校正

目鏡測微尺：這是一種專門用于顯微鏡測量的工具，通常安裝在顯微鏡的目鏡上。

鏡臺測微尺：這是一個已知長度的標準尺，用于校正目鏡測微尺。

校正步驟：

將鏡臺測微尺放在顯微鏡的載物臺上，并使其刻度朝上。

將目鏡測微尺放入目鏡內，并調整顯微鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度線重合。

觀察并記錄鏡臺測微尺上某一長度（如10格）在目鏡測微尺上對應的格數。

根據已知鏡臺測微尺的長度和目鏡測微尺上的格數，計算出目鏡測微尺每格所代表的實際長度，即校正值。這個過程需要在低倍鏡、高倍鏡及油鏡下分別進行，因為不同放大倍數下，目鏡測微尺的每格長度會有所不同。

二、微生物樣本制備

取樣：從待測微生物群體中隨機選取一定數量的樣本。

制片：將樣本制成水浸片或染色涂片，并放置在顯微鏡的載物臺上。

三、測量與記錄

調焦與定位：使用顯微鏡的低倍鏡先找到微生物的視野，然后逐漸轉換到高倍鏡或油鏡，并調整焦距使微生物圖像清晰。

測量：使用目鏡測微尺測量微生物的寬度和長度。在測量時，應注意微生物的形態可能因放大倍數而有所變化，因此需要在同一放大倍數下進行測量。

記錄：記錄每個微生物的寬度和長度所對應的目鏡測微尺格數，并乘以相應的校正值，得到微生物的實際寬度和長度。

重復測量：為了提高測量的準確性，通常需要測量多個（如10個）微生物樣本，并計算其平均值作為最終結果。

四、注意事項

在測量過程中，應確保顯微鏡的放大倍數、焦距等參數保持不變，以避免測量誤差。

對于形態不規則的微生物，應選擇合適的測量方法和參數進行描述和記錄。

在使用油鏡時，應注意鏡頭的保護和清潔，避免鏡頭與玻片相撞或污染。

通過上述步驟，可以在光學顯微鏡下精確測量微生物的大小，為微生物學研究和應用提供可靠的數據支持。